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    臨床級凍存液

    更新時間:2023-10-24

    訪問量:2592

    廠商性質(zhì):代理商

    生產(chǎn)地址:

    簡要描述:
    臨床級凍存液用剝離溶液收集要冷凍保存的細胞,并計數(shù)細胞數(shù)。
    貨號MS-4601W SMS-4702WS規(guī)格1箱
    供貨周期一個月主要用途再生醫(yī)學、干細胞庫、日本細胞培養(yǎng)中心CPC(Cell Processing Ce
    應用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合
      CP-1細胞凍存液(臨床級凍存液)
     
      ?獲得日本再生醫(yī)學等產(chǎn)品材料的資格認證
     
      1.產(chǎn)品從1992年開始推廣應用
     
      2.在日本國內(nèi)的GMP設備中生產(chǎn)制造
     
      3.進行了非臨床實驗
     
      5.可以在-80℃的冰箱中冷凍保存
     
      6.不含動物來源的成份
     
      7.成分公開透明
     
      8.擁有日本原料藥注冊證(MF)

      應用實例
     

      I 懸浮細胞和貼壁細胞的冷凍方法
     

     

      II 使用CP-1HG冷凍保存/解凍造血干細胞的方法
     

     

      III。 使用CP-1HG間充質(zhì)干細胞冷凍保存/解凍方法
                   冷凍保存液的制備
                     ·1.CP-1高等級,25%HSA,將介質(zhì)冷卻至4℃。
                     ·2.將CP-1高級6.8 mL,25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中,并均勻混合。
                     ·3.即將使用之前,請保存在4℃下。
                    細胞冷凍保存
                     ·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細胞,并計數(shù)細胞數(shù)。
                     ·2.離心除去上清液。
                     ·3.預先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養(yǎng)基(冷凍保存液-2的制備),均勻懸浮至1×106細胞/ mL。
                     ·4.將各1 mL放入冷凍管中,放入冷凍容器中,并在-80°C緩慢冷凍。
                     ·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
                     解凍細胞
                     ·1.事先在離心管中準備9 mL培養(yǎng)基。
                     ·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管,并在37°C的溫水浴中快速融化。
                     ·3.將所有解凍的細胞添加到培養(yǎng)基中并離心。
                     ·4.除去上清液,并添加適量的培養(yǎng)基。
                     ·5.在每種使用的細胞類型的最佳條件下進行培養(yǎng)。 
     
      IV 評價結(jié)果(間充質(zhì)干細胞冷凍保存)
     
      V 使用CP-1HG冷凍保存iPS / ES細胞并進行評估
     
      Ⅰ. 懸浮細胞和貼壁細胞的冷凍方法
     
      Ⅱ.CP-1®High Grade保存/解造血干胞的方法Ⅲ.CP-1®High Grade應用于間質(zhì)胞冷保存/解
     
      冷凍保存液的制備
     
      ·1.CP-1高等級,25%HSA,將介質(zhì)冷卻至4℃。
     
      ·2.將CP-1高級6.8 mL,25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中,并均勻混合。
     
      ·3.即將使用之前,請保存在4℃下。
     
      細胞冷凍保存
     
      ·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細胞,并計數(shù)細胞數(shù)。
     
      ·2.離心除去上清液。
     
      ·3.預先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養(yǎng)基(冷凍保存液-2的制備),
     
      均勻懸浮至1×106細胞/ mL。
     
      ·4.將各1 mL放入冷凍管中,放入冷凍容器中,并在-80°C緩慢冷凍。
     
      ·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。
     
      解凍細胞
     
      ·1.事先在離心管中準備9 mL培養(yǎng)基。
     
      ·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管,并在37°C的溫水浴中快速融化。
     
      ·3.將所有解凍的細胞添加到培養(yǎng)基中并離心。
     
      ·4.除去上清液,并添加適量的培養(yǎng)基。
     
      ·5.在每種使用的細胞類型的最佳條件下進行培養(yǎng)。
     
      Ⅳ.結(jié)果(質(zhì)胞冷保存
     
      [目的]關(guān)于有望在將來用于再生醫(yī)學的人間充質(zhì)干細胞(hMSCs)可以冷凍保存在CP-1高等級中,并可以通過廉價,方便的干冰穩(wěn)定地長期運輸嗎?
     
      [方法]將人脂肪來源的間充質(zhì)干細胞(MSC-AT)或人骨髓來源的間充質(zhì)干細胞(MSC-BM)冷凍在CP-1High Grade或?qū)φ罩?下圖中的A)(1 x 106細胞)  / mL),并儲存在液氮罐中。 儲存在液氮罐中后,應在假定干冰運輸(-80°C·7天,-60°C·3天,60°C·7天),融化后立即存活率和第二天培養(yǎng)的每種條件下儲存 確認對血管的粘附率(粘附率=活細胞數(shù)/接種的活細胞數(shù))。
     
      [結(jié)果]在所有條件下,融化后的存活率均為90%以上,未觀察到差異(下圖B)。 然而,在冷凍的hMSC作為對照中,解凍后的第二天在-60°C儲存時觀察到許多未粘附在培養(yǎng)箱中的死細胞,但是在CP-1中冷凍的hMSC中幾乎沒有觀察到死細胞,并且?guī)缀鯖]有觀察到所有死細胞。 連接細胞(下圖中的B和C)。
     
      [結(jié)論]由于干冰本身的溫度約為-80°C,因此我們認為在CP-1High Grade中冷凍的hMSC可以使用干冰穩(wěn)定且長期運輸。
     

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